93.杀鼠狂魔(2/3)
送6-0周龄的小白鼠,要200只。”高风对李友良交代道,“该准备巨噬细胞了。”
第二天正好是周六,除了程松要跟着老师上门诊,其他人下午都没去科室。
齐楠楠负责把这些新弄来的小白鼠全部杀掉,“我来帮你。”胡嘉然想去戴手套。
“不用,就这么点,我自己还不够杀呢。”齐楠楠嘎嘣一个,再嘎嘣一个,脸上还露着笑容。
胡嘉然突然间打了个寒战,“你说她是不是变态啊”他对李友良说,“杀鼠狂魔!”
“是跟别人的女孩子不太一样。”李友良看了齐楠楠一眼。
用无菌剪刀剪开小白鼠皮肤,暴露腹膜。用吸管注入6ml培养液,反复冲洗,吸出冲洗液,再放入0ml离心管。
用20%小牛血清的培养液混悬,调整细胞数为05/ml.加入96孔板,00ul/孔。放入37度孵箱培养。
这样下来巨噬细胞的制备就算完成了,接下来是骨髓瘤细胞的准备。
于融合前4-36小时,将骨髓瘤细胞扩大培养,融合当天,用弯头滴管将细胞从瓶壁轻轻吹下,收集于50ml离心管或融合管内。
再用离心机以000转每分钟离心5-0分钟,弃去上清。
加入30ml不完全培养基,离心洗涤一次。然后将细胞重悬浮于0ml不完全培养基,混匀。
取骨髓瘤细胞悬液.......
这一步看起来简单,但是操作很稀碎,几个人累的腰酸背疼的。
再下来是脾细胞的准备,
取已经免疫的小白鼠,摘除眼球采血,并分离血清作为抗体检测时的阳性对照血清。
同时通过颈脱位致死小鼠,浸泡于75%酒精中5分钟,于培养皿上固定后掀开左侧腹部皮肤,可看到脾脏,换眼科剪镊,在超净台中用无菌手术剪开腹膜,取出脾脏置于已盛有0ml不完全培养基的平皿中,轻轻洗涤,并细心剥去周围结缔组织。
这一步完全是胡嘉然的表演时间,高风要特别集中注意力才能跟上他的步骤,李友良和程松表现的更不堪,两个人做完2个,发现胡嘉然已经做好个了。
“要不都包给嘉然算了。”程松整个人都不好了,“这对于我来讲太难了。”
“伱别跟嘉然比。”李友良安慰他道,“咱们这才是正常的操作速度,他是特例,可能是单身太久练就的双手熟练度。”
由于还要进行细胞融合和杂交瘤细胞的选择,中间没法停留太长时间,几人直接
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