第三十七章 孟德尔随机化(2/3)
毒器官,肝细胞癌的发展与遗传突变、环境因素和病毒感染等多种复杂机制相关。
为了研究这些机制,陈飞决定利用系统提供的实验思路,将现代生物信息学和孟德尔的随机化思想结合起来,找出与肝细胞癌相关的关键基因。
这对于后续开发出有效的治疗方法有很大的意义。
设计实验的第一步:获取RNA-seq数据
陈飞抱紧系统大腿,快速打开了公开数据平台“GEO数据库”,这里有大量的公开生物学数据,其中就包括RNA-seq数据。
他选择了几组肝细胞癌患者的样本,并找到相对应的健康对照组的数据。
这一步非常关键。RNA-seq数据庞大而复杂,需要通过严格的筛选和清洗,才能得出有效的差异表达基因(DEGs)。
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差异表达基因就是在疾病状态下与正常状态相比,表现出显著表达差异的基因。
第二步:随机化采样
有了数据之后,陈飞便开始进入实验的核心步骤——随机化设计。
孟德尔的豌豆实验中,随机化是为了消除实验中的人为偏差,每次他从不同的豌豆品种中随机选择个体进行杂交实验,这种方法使得实验结果更具可信度。
孟德尔随机化正是将这个思想引入了现代RNA-seq数据分析。
在他的设计中,他将癌症组和健康对照组的数据进行多次随机化采样。
通过反复随机抽样,他能够确保每次抽取的样本都能代表总体的真实情况。这种方法极大地减少了数据噪音,确保筛选出的差异基因更具生物学意义。
“就像孟德尔反复进行豌豆杂交一样,我也要在这批数据里反复筛选。”陈飞默默念道,手指飞快地在键盘上敲打。采样工作虽然枯燥,但非常关键。
第三步:差异基因分析
随机化采样完成之后,接下来就是关键的差异基因分析步骤了。陈飞使用了R语言中的“DESeq2”包,这是RNA-seq数据分析中非常常用的工具包,专门用来识别差异表达基因。
作为一个苦逼的生物领域搬砖人,陈飞甚至都没有下载过R语言的软件,但是系统君的实验思路写的非常认真,直接让他去参考转码人救星CSDN,
在指导下,陈飞很快安装好了R语言以及RSstudio。
一切准备就绪,可以开大了!
参考着github上一些前人的代码,一顿CtrlC,
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